常用的冷冻技术有哪些

　　常用的冷冻技术有哪些?南阳不孕不育医院(南阳天伦医院)妇科医师指出，冷冻保存技术中的关键问题是如何提高细胞冻存的存活率。目前临床上常用的冷冻技术主要有以下几种：

　　1、程序化慢速冷冻法。将细胞或组织室温下在低浓度的冷冻保护剂溶液中预平衡，然后放置在终浓度的冷冻液中，使胞内渗透压增高，细胞内液冰点下降。在冷冻仪内于预设的程序下在室温到植冰点之间降温。

　　助孕技术中常采用的植冰温度是-8～-6℃。在诱导冰晶形成时，导管离开冷冻仪的距离宜短，操作动作必须快，以预防温度波动过大。植冰使溶液浓度进一步增高，细胞进一步脱水。植冰后，在适宜冷冻速率下.溶液中的水逐渐转变为冰晶，溶质的浓度越来越高，细胞内、外液渐渐变为极其黏稠的状态，温度降到-150℃，放入液氮罐内保存。

　　2、玻璃化冷冻。将高浓度冷冻保护剂在快速冷冻过程中能够由液态直接变为黏稠、非结构的玻璃态，而无任何冰晶形成的技术。2080年代开始发展，主要的优点是简化操作步骤.缩短冷冻处理时间，不需程序冷冻仪，预防消耗大量液氮.因而日益受到重视。

　　玻璃化冷冻的步骤一般是在高浓度的冷冻保护剂短时间平衡之后，使用少的液体体积、采用导热性优选的、管壁薄或无管壁的容器作为标本载体，直接投入液氮中，以达到以快的降温速度，实现溶液的玻璃化。

　　有两条途径：一是极其快速的冷冻速率，二是极其高浓度的溶质。高浓度冷冻液可能存在潜在毒性，故应选择低薄性、低浓度冷冻保护剂或两种冷冻保护剂联合应用。（推荐阅读：人卵母细胞体外培养技术）

　　3、胚胎冷冻技术。冷冻胚胎的选择对是否能取得良好的冷冻效果至关重要。2～8细胞期胚胎的冷冻标准为I~Ⅱ级的高质量胚胎，细胞碎片<20%。含4～8细胞的分裂球的胚胎主要用胚胎慢速程序冷冻快速解冻法。

　　胚囊的冷冻可采用玻璃化玲冻技术。多数学者认为在囊胚期实施冷冻有浪费胚胎之嫌，但可以淘汰生存能力不良的胚胎，终的结果是妊娠率的提高和多胎妊娠率的降低。

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